Hầu hết các thành phần tế bào đều không màu và không thể phân biệt rõ ràng dưới kính hiển vi. Tiền đề cơ bản của kính hiển vi huỳnh quang là nhuộm các thành phần bằng thuốc nhuộm.
Thuốc nhuộm huỳnh quang, còn được gọi là thuốc nhuộm huỳnh quang hoặc thuốc nhuộm huỳnh quang, là các phân tử hấp thụ ánh sáng kích thích có bước sóng nhất định (thường là tia cực tím) và phát ra ánh sáng có bước sóng dài hơn sau một khoảng thời gian trễ ngắn. Độ trễ giữa sự hấp thụ và phát xạ là không đáng kể, thường ở mức nano giây.
Ánh sáng phát ra sau đó có thể được lọc khỏi ánh sáng kích thích để tìm ra vị trí của chất huỳnh quang.
Kính hiển vi huỳnh quang sử dụng ánh sáng mạnh hơn để chiếu sáng mẫu. Ánh sáng này kích thích vật liệu huỳnh quang trong mẫu, sau đó vật liệu này phát ra ánh sáng ở bước sóng dài hơn.
Hình ảnh thu được dựa trên bước sóng phát xạ của nguồn sáng thứ hai hoặc chất huỳnh quang khác với ánh sáng ban đầu được sử dụng để chiếu sáng và kích thích mẫu.
xử lý
Ánh sáng ở bước sóng kích thích được tập trung vào mẫu qua thấu kính vật kính. Huỳnh quang phát ra từ mẫu được tập trung vào máy dò thông qua thấu kính vật kính. Vì hầu hết ánh sáng kích thích được truyền qua mẫu nên chỉ có ánh sáng kích thích phản xạ đi tới vật kính cùng với ánh sáng phát ra.
hình thức
"Kính hiển vi huỳnh quang" dùng để chỉ bất kỳ kính hiển vi nào sử dụng huỳnh quang để tạo ra hình ảnh, cho dù đó là thiết bị đơn giản hơn như kính hiển vi huỳnh quang epi hay thiết kế phức tạp hơn như kính hiển vi đồng tiêu, sử dụng phân đoạn quang học để thu được độ phân giải tốt hơn. Hình ảnh huỳnh quang.
Hầu hết các kính hiển vi huỳnh quang được sử dụng là kính hiển vi phát quang, trong đó việc kích thích các chất phát huỳnh quang và phát hiện huỳnh quang được thực hiện thông qua cùng một đường quang học (tức là thông qua vật kính).
