Đây là một kính hiển vi quang học trong đó độ lệch ánh sáng nhỏ hoặc sự dịch pha xảy ra trong quá trình ánh sáng xuyên qua mẫu không nhuộm. Những sự dịch pha này chuyển thành hình ảnh, nghĩa là khi ánh sáng truyền qua một mẫu mờ đục, sự dịch pha sẽ làm sáng mẫu đó, tạo ra hình ảnh được chiếu sáng (sáng) ở hậu cảnh.
Kính hiển vi tương phản pha tạo ra hình ảnh có độ tương phản cao khi làm việc với các mẫu trong suốt, vì vậy điều này đặc biệt đúng đối với hình ảnh nuôi cấy vi sinh vật, các mảnh mô mỏng, mô tế bào và các hạt dưới tế bào.
Nguyên lý hoạt động của kính hiển vi tương phản pha là sử dụng các phương pháp quang học để chuyển đổi mẫu vật thành hình ảnh có biên độ, được nhìn qua thị kính của kính hiển vi.
PCM có thể được sử dụng để xem các ô không bị nhuộm màu (còn được gọi là vật thể pha), có nghĩa là hình thái của các ô được duy trì và các ô có thể được quan sát ở trạng thái tự nhiên, với độ tương phản cao và độ rõ hiệu quả. Điều này là do nếu mẫu vật được nhuộm màu và cố định, chúng sẽ tiêu diệt hầu hết các tế bào, một đặc điểm mà kính hiển vi ánh sáng trường sáng không thể loại bỏ được.
Những thay đổi xảy ra trong quá trình xuyên thấu ánh sáng được chuyển thành những thay đổi về biên độ, gây ra độ tương phản của hình ảnh.
Kết hợp với các yếu tố tăng cường độ tương phản như huỳnh quang, chúng cho phép trình bày hình ảnh mẫu vật tốt hơn.
Các bộ phận của kính hiển vi tương phản pha
Thiết bị của kính hiển vi tương phản pha dựa trên đường truyền ánh sáng từ nguồn sáng đến hình ảnh trực quan.
Do đó, trình tự của nó bao gồm:
Nguồn sáng (đèn hồ quang thủy ngân)
bắn nhóm
miệng vỏ
tụ điện
Bình ngưng vòng
mẫu vật
Mục đích
tấm ảnh
ánh sáng phân cực
vòng pha
Đặc điểm kính hiển vi tương phản pha
Sự thay đổi gây ra bởi ánh sáng tán xạ (bị lệch) bị lệch và ánh sáng không bị lệch đi tới mẫu nơi nó được hấp thụ được tạo ra ở một bước sóng nhất định và tạo ra màu sắc. Sự khác biệt gây ra bởi ánh sáng tán xạ và ánh sáng hấp thụ được gọi là sự thay đổi biên độ. Những thay đổi biên độ này rất nhạy và do đó không thể nhìn thấy được bằng thiết bị chụp ảnh như kính hiển vi tương phản pha và do đó mắt người có thể nhìn thấy được.
Thiết bị ngưng tụ của kính hiển vi tương phản pha có một đĩa mờ đục gọi là bánh rán, trong khi bánh rán trong suốt tạo ra một hình nón ánh sáng truyền qua mẫu. Khi ánh sáng thay đổi, một số ánh sáng trên mẫu bị bẻ cong do thay đổi mật độ quang, tạo thành ảnh trên vật kính. Ánh sáng không bị lệch sẽ chạm vào các vòng pha trên tấm pha, trong khi ánh sáng bị lệch sẽ bỏ lỡ các vòng pha truyền trực tiếp qua tấm pha, tạo thành hình ảnh.
Kính hiển vi tương phản pha được thiết kế với vật kính có thể thực hiện nhiều chức năng khác nhau khi sử dụng kết hợp với các kỹ thuật tăng cường độ tương phản như huỳnh quang. Vật kính được đặt trong một tấm pha bên trong, tấm này thay đổi độ hấp thụ ánh sáng và dịch pha (tức là không bị nhiễu xạ), tạo ra phổ rộng để tương phản với mẫu và tạo độ tương phản mạnh ở nền.
Ứng dụng của kính hiển vi tương phản pha
Xác định hình thái của tế bào sống, chẳng hạn như tế bào động vật và thực vật
Nghiên cứu khả năng vận động và cấu trúc chuyển động của vi sinh vật
Phát hiện các yếu tố vi sinh vật nhất định như nội bào tử vi khuẩn
