Các thành phần điển hình của mộtkính hiển vi huỳnh quanglà:
Thuốc nhuộm huỳnh quang (fluorophores)
Fluorophore là một hợp chất huỳnh quang phát ra ánh sáng trở lại khi bị kích thích bởi ánh sáng.
Fluorophores thường chứa một số nhóm thơm liên kết, hoặc là các phân tử phẳng hoặc tuần hoàn có một số liên kết π.
Nhiều loại thuốc nhuộm huỳnh quang đã được thiết kế cho nhiều phân tử sinh học.
Một số trong số này là các phân tử nhỏ vốn có khả năng phát huỳnh quang và liên kết với phân tử sinh học quan tâm. Ví dụ điển hình trong số này là các chất nhuộm axit nucleic như DAPI và Hoechst, phalloidin, được sử dụng để nhuộm sợi Actin trong tế bào động vật có vú.
nguồn sáng
Bốn loại nguồn sáng chính được sử dụng, bao gồm đèn hồ quang xenon hoặc đèn thủy ngân với bộ lọc kích thích, tia laser và đèn LED công suất cao.
Laser chủ yếu được sử dụng trong các kỹ thuật kính hiển vi huỳnh quang phức tạp, trong khi đèn xenon, đèn thủy ngân và đèn LED với bộ lọc kích thích lưỡng sắc thường được sử dụng trong kính hiển vi huỳnh quang trường rộng.
Bộ lọc kích thích
Bộ kích thích thường là một bộ lọc thông dải chỉ truyền các bước sóng được hấp thụ bởi fluorophore, do đó giảm thiểu sự kích thích từ các nguồn huỳnh quang khác và chặn ánh sáng kích thích trong dải phát xạ huỳnh quang.
gương lưỡng sắc
Bộ lọc lưỡng sắc hoặc bộ lọc màng mỏng là bộ lọc màu rất chính xác được sử dụng để phản chiếu có chọn lọc ánh sáng trong một phạm vi màu nhỏ trong khi phản chiếu các màu khác.
Bộ lọc khí thải.
Bộ phát thường là một bộ lọc thông dải chỉ truyền bước sóng do fluorophore phát ra và chặn tất cả ánh sáng không mong muốn bên ngoài dải này, đặc biệt là ánh sáng kích thích.
Bộ lọc đảm bảo nền tối thiểu bằng cách lọc năng lượng kích thích không mong muốn (bao gồm tia UV và IR) hoặc sự tự phát huỳnh quang của mẫu và hệ thống.
